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如何正确使用美国PE色谱柱?
  • 发布日期:2021-07-27      浏览次数:81
    •   美国PE色谱柱的正确使用包含:加装保护柱,过滤流动相和样品,净化样品,避免过高的柱压等。
       
        美国PE色谱柱加装保护柱的作用是过滤掉来自流动相和样品的化学“拉圾”同时也可以有效除去流动相和样品中的不溶物。尽管现在的色谱仪在流动相吸入口、进样阀后部以及在色谱柱的两端都装有不同孔径的滤器,但滤器只能除去不溶性颗粒而不能除去化学污然,因此,加装保护柱是必要的,特别是在分析中药、中成药等复杂混合物和生物样品时更是保护分析柱不可缺少的措施。保护柱填料应与分析柱一致,粒径可较分析柱大。保护柱属消耗品,经过一定次数的样品分析后,出现柱压显著升高或峰形变坏或基线漂移时,应考虑更换保护柱。
       
        过滤流动相和样品:流动相通常由水或缓冲溶液与有机溶剂混合而成,原则上,所有经过色谱柱的流动相均应过滤,但在实际操作上应视具体情况而有所区别:当有机溶剂用色谱纯级,水用石英亚沸水或其它超纯水时,在能确保水和有机溶剂的质量且没有受到污染时,过滤并无更多实际意义。当流动相中含有缓冲盐时,则过滤是必要的,如前所述,当缓冲溶液放置一段时间后,在使用前还应重新过滤。装流动相的容器和色谱系统中的在线滤器要定期清洗和更换,以避免滤器因过载而起不到过滤作用。
       
        净化样品:当样品中含有对色谱柱有损害的化学成分,如产生长久性吸附的蛋白质、糖等有机分子和强吸附性物质,以及可能对柱填料产生破坏作用的基团离子。在进样前应尽可能对样品进行分离提纯以除去多余杂质组分。
       
        避免过高的柱压:虽然美国PE色谱柱能耐受的压力可达高,但过高及过大的压力变化均会缩短色谱柱的寿命,避免的方法是柱压过高时,尽可能采用较小的流速,以不超过柱最大允许压力的一半为宜。当流速较大时,应采取流速梯度的办法使流速分步到位。使用手动进样阀时,进样阀的切换要尽可能的快。否则超过20%的压力冲击会很快使柱报废。当使用多柱联用时,柱切换要避免在高压下进行。
       
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