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沃特世UPLC柱配套消耗品及使用维护
  • 发布日期:2020-01-09      浏览次数:328
    • 如何延长UPLC柱寿命

      关于流动相

      • 选择优质的色谱级流动相溶剂;
      • 确保使用超纯水,纯化水系统应始终处于良好的工作状态;
      • 通道中避免使用100%水相,如含有5-10%有机相就可显著抑菌; 如果必须使用100%水相,则每24-48小时必须新鲜配制、完全 更换(含溶剂瓶)
      • 对流动相水溶液部分使用0.2 µm过滤膜过滤(推荐使用:沃特世P/N:186003524 0.2 µm 47 mm GHP)

      关于样品制备

      • 样品溶液中的微粒会堵塞系统管路或色谱柱,可使用高速离心

      /或用0.2 µm过滤膜过滤样品,确保滤膜与样品溶液兼容(推荐使用:沃特世 P/N: WAT097962,针式过滤膜GHP;或垂询我们)

      • 确保样品与流动相体系兼容,进样后不会发生沉淀;
      • 较脏的样品,容易造成色谱柱污染,使用适合的固相萃取小柱对样品进行净化处理。

      清洗与再生

      亲水作用色谱柱操作建议

      (CORTECS HILICBEH HILICBEH Amide)

      亲水作用色谱柱的使用方法与反相色谱柱有很大的不同,需要加以

      注意。(关于HILIC,请访问waters.con/hilic,并参考《HILIC   综合指南》,715002531ZH)

      样品制备

      • 应尽可能使用较高比例的有机溶剂(95%乙腈),以避免溶剂效应。如果存在样品溶解问题,应至少使用50/50乙腈/水,并减少进样体积。

      柱平衡

      • 初次使用时,先用50倍柱体积的50/50乙腈/(CORTECS HILICBEH HILIC,如果流动相条件含有缓冲盐则需添加10 mM流动相缓冲盐)60/40乙腈/(BEH Amide)对柱进行老化;
      • 开始进样前,用20倍柱体积的起始流动相条件进行平衡;
      • 如果使用梯度条件,每次梯度之间,用8-10倍柱体积的起始流动相条件再次平衡。
      • 没有充分老化平衡的色谱柱,将会出现柱效较低、以及保留时间漂移的问题。

      柱清洗再生

      • 对于ACQUITY UPLC BEH HILICCORTECS HILIC色谱柱,用

      50/50乙腈/水清洗以去除极性污染物。如果不能解决问题,用5/95

      的乙腈/水冲洗;

      • 对于ACQUITY UPLC Amide色谱柱,可采用10分钟的梯度洗脱从100%有机相到100%水相。值得注意的是当水相比例升高,压力将迅速增加,当水相比例超过60%时需降低流速。如果有必要可重复清洗。

      柱保存

      • 先将缓冲盐从色谱柱内冲洗干净,然后将色谱柱保存在95/5乙腈/(BEH HILICCORTECS HILIC)100%乙腈(BEH Amide)中。

       

      过滤膜

      沃特世建议您使用0.2 µm的过滤膜对缓冲溶液和样品进行过滤, 以避免颗粒物质堵塞色谱柱和仪器部件。

      产品描述

      部件编号

      0.2 µm, 47 mm GHP溶剂过滤膜(100/包)

      186003524

      0.2 µm, GHP针式过滤器(100/包)

      WAT097962

      0.2 µm, GHP针式过滤器(300/包)

      WAT097963

      0.2 µm, GHP针式过滤器(1000/包)*

      186005595

      0.2 µm, PVDF针式过滤器(100/包)**

      WAT200804

      UPLC柱配件

      1.0 mm UPLC 柱入口/出口过滤筛板, 0.2 µm, 3 个/包700003775
      3.0 mm UPLC柱入口/出口过滤筛板,0.2 µm,3 个/包700004790
      2.1 mm UPLC 柱入口端螺母,1 个/包 700003779
      2.1 mm UPLC 柱出口端螺母,1 个/包 700003780
      1.0 mm UPLC 柱入口端螺母,1 个/包 700003777
      1.0 mm UPLC 柱出口端螺母,1 个/包 700003778
      3.0 mm UPLC柱出口端螺母,1个/包 700004791

      UPLC柱的连接

      ACQUITY UPLC系统使用专门设计的可耐受高压并且有最

      小柱外体积的管路和接头。zui佳的色谱柱进口管路(订货号430001084)是随ACQUITY     UPLC色谱系统配的,进样阀末端的管路清晰地用蓝色标记标示出来,将这根管路的另一端插入UPLC色谱柱的入口端并用5/16英寸的扳手拧紧。关于ACQUITY   UPLC色谱柱正确的出口管路,请参考ACQUITY UPLC系统操作手册的相关检测器部分(订货号71500082502)。

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