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HPLC峰型不佳原因
  • 发布日期:2021-08-09      浏览次数:221
    •                                                                        HPLC峰型不佳原因

                                                                         检硕科学上海有限公司

      1. 未出峰    可能的原因:

      a. 未成功进样,或样品未溶解进溶剂中,或样品分解变质或样品浓度太低;

      b. 液相色谱仪器本身的问题:泵或者检测器故障;

      c. 流动相选择不合适,如对于反相硅胶柱来说,若流动相极性太大,是冲不下来一些小极性的物质的,物质一直保留在柱子中,因而不出峰;

      d. 检测器不合适,如有些产品没有紫外吸收或者吸收很弱,但是检测还使用了UV检测器;

      2.平头峰     可能的原因:

      a. 样品浓度过大或进样体积太大,这个也是大多数原因;

      b. 液相色谱仪检测器设置不正确;

      3.负峰     可能的原因:

      a. 流动相吸收本底值过高;

      b. 进样过程中进入空气;

      c. 样品组分的吸收低于流动相;

      d. 配制样品的溶剂与流动相不一致;

      4.肩峰     可能的原因:

      a. 进样量过大,样品浓度过高;

      b. 保护柱或色谱柱柱头堵塞;

      c. 保护拄或色谱柱污染或失效;

      d. 色谱柱柱头塌陷;

      5.裂峰     可能的原因:

      a. 溶剂效应:溶解样品用的溶剂和起始流动相极性相差太大;

      b. 保护柱或色谱柱柱头堵塞;

      c. 保护拄或色谱柱污染或失效;

      d. 色谱柱柱头塌陷;

      6.鬼峰     可能的原因:

      鬼峰(ghost peak)是在某个谱图里出现,可能同样的条件再做一次又不出现了,时有时无的峰。

      a. 进样阀残余峰,在每次进完样后用充足的时间来平衡和清洗系统;

      b. 样品中存在未知物,改进样品的预处理;

      c. 流动相污染,更换新流动相(或者换品牌);尽可能现配现用,隔夜的流动相再次使用时要过滤;

      d. 流路中有小的气泡,打开Purge阀,加大流速排除;

      7. 前伸峰     可能的原因:

      a. 进样量或样品浓度高;

      b. 溶解样品的溶剂比流动相极性强;

      c. 保护拄或色谱柱污染或失效;

      d. 流动相不合适,更换新流动相(调pH或换种类、比例等);

      8. 拖尾峰     可能的原因:

      a. 进样量或样品浓度高;

      b. 流动相不合适,更换新流动相(调pH或换种类、比例等);

      c. 硅羟基作用:加入三乙胺,用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相pH值,钝化样品;

      d. 柱内烧结不锈钢失效:更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品;

      e. 色谱柱柱头塌陷或柱效下降:更换色谱柱;

                                                                                                                                           本篇转载至实验之家

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